Startpagina / Samenvattingen / ISE Nester's Microbiology: a Human Perspective / vector-dna-marker

Biotechnologie - Moleculaire klonering

Q: Waar bestaat een vector uit waardoor het kloneren makkelijker word?

Multiple cloning site: een kleine nucleotide sequens die restrictie enzymen herkennen en waar een insert van DNA ingezet wordt. selectable marker: meestal iets waardoor je kunt onderscheiden of de vector in de bacterie zit zoals een antibiotica resistentie. second selectable marker : zoals lacZ om zichtbaar koloniën te onderscheiden die een recombinant molecuul hebben

5 belangrijke vragen over Biotechnologie - Moleculaire klonering

Waarom wordt het zelfde restrictie enzym gebruikt om de vector en het insert te knippen?

Dit komt omdat de vector en de insert aan elkaar moeten binden om in een bacterie te brengen. Dus deze moeten met het zelfde restrictie enzym worden geknipt om een zelfde DNA sequentie te kunnen verkrijgen zodat deze twee aan elkaar kunnen binden.

Welke functie heeft het lacZ gen in een vector?

LacZ kan een polypeptide dat aan het chemicaliën X-gal bind een blauw pigment laten produceren. Cellen die dus een intact vector hebben hebben een functionerend lacZ gen en dus vormen ze blauwe kolonies en degene die recombinant molecuul bevatten worden wit

Welk enzym wordt gebruikt oude genetische fragmenten aan elkaar te hechten voor een vector?

DNA ligase hecht de vector en het DNA van intrest weer aan elkaar waardoor er een recombinant molecuul wordt gevormd

Waar bestaat een vector uit waardoor het kloneren makkelijker word?

Multiple cloning site: een kleine nucleotide sequens die restrictie enzymen herkennen en waar een insert van DNA ingezet wordt.
selectable marker: meestal iets waardoor je kunt onderscheiden of de vector in de bacterie zit zoals een antibiotica resistentie.
second selectable marker : zoals lacZ om zichtbaar koloniën te onderscheiden die een recombinant molecuul hebben

Waarom is een second selectable marker nodig?

Dit is nodig omdat het voor kan komen dat er bacteriën zijn die kunnen groeien op een selectieve plaat die geen vector hebben. Op zich kun je dat niet zien maar die ga je dan wel gebruiken in je onderzoek. Dus om zichtbaar te maken welke bacteriën gemodificeerd zijn en welke niet weet je zeker dat je de juiste bacteriën gaat gebruiken voor je onderzoek.

De vragen op deze pagina komen uit de samenvatting van het volgende studiemateriaal:

ISE Nester's Microbiology: a Human Perspective | 9781265062316 | Sarah Salm, et al

Bekijk samenvatting